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腺病毒包裝服務(wù)中腺病毒感染的特點(diǎn)
發(fā)布日期：
2016-09-21
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腺病毒包裝服務(wù)其主要原理是將目的片段克隆到腺病毒表達(dá)載體上，表達(dá)載體與腺病毒包裝質(zhì)粒通過(guò)重組后導(dǎo)入腺病毒包裝細(xì)胞進(jìn)行包裝，包裝好的病毒進(jìn)一步進(jìn)行擴(kuò)增和滴度測(cè)定。目前較常用的系統(tǒng)如AdEasy，AdMax，以及invotrogen的穿梭系統(tǒng)。不同的包裝系統(tǒng)其表達(dá)載體與包裝載體發(fā)生重組的方式，場(chǎng)所都有所不同，如AdEasy系統(tǒng)是在細(xì)菌里發(fā)生重組的，重組的質(zhì)粒線性化后轉(zhuǎn)染細(xì)胞可包裝成腺病毒，AdMax系統(tǒng)表達(dá)載體與包裝載體是在細(xì)胞中發(fā)生重組，invitrogen的穿梭系統(tǒng)則是體外重組。與傳統(tǒng)的轉(zhuǎn)染方式相比，如脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染、腺病毒感染具有以下特點(diǎn)：
1.可感染的細(xì)胞種類多，宿主范圍廣，幾乎可以感染所有類型的細(xì)胞。
2.感染效率高，特別適合質(zhì)粒載體轉(zhuǎn)染效率低的細(xì)胞，如原代培養(yǎng)細(xì)胞，神經(jīng)細(xì)胞等，且外源基因表達(dá)水平較高。
3.包裝外源基因的片段大，高達(dá)10kb。
4.腺病毒載體構(gòu)建及包裝容易操作，易于制備出滴度高的大量病毒。
5.當(dāng)腺病毒感染細(xì)胞后，病毒基因組存在于細(xì)胞染色體外，不整合到細(xì)胞染色體中，避免了因整合引起的基因突變及激活致癌基因，生物安全性高。
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